Ифа диагностика что это такое

Содержание

Что такое ИФА и ПЦР: анализы на хламидии?

ИФА и ПЦР на хламидии

Многие годы пытаетесь избавиться от ПАРАЗИТОВ?
Глава Института: «Вы будете поражены, насколько просто можно избавиться от паразитов принимая каждый день...

Читать далее »

Заболевания, что передаются половым путем, по частоте случаев можно сравнить разве что с простудой и гриппом. Среди них самыми опасными считаются инфекционные заболевания, так как они распространяются среди населения в геометрической прогрессии, а также требуют долгого трудоемкого лечения. Хламидиоз – яркий представитель такой группы инфекций, причем диагностировать наличие такой патогенной флоры достаточно сложно.

Современная медицина разработала множество новейших методик диагностирования инфекций, условно-патогенной флоры и вирусов. ИФА и ПЦР – наиболее востребованные процедуры сегодня благодаря своим максимально точным результатам обследований. Несмотря на это если после проведения анализа был получен положительный ответ, это не является подтверждением хламидиоза.

загрузка...

ПЦР на хламидии

Диагностировать хламидиоз у пациента однозначно практически невозможно, даже если ИФА или ПЦР выявил хламидии. По статистике, в большинстве случаев анализы на хламидии дают неверные результаты, а специалист может поставить неверный диагноз. Исследования на полимерную цепную реакцию – это самый точный метод выявления инфекции, к которому пациенту не нужно готовиться.фото 1

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для избавления от паразитов наши читатели успешно используют Intoxic. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Преимуществом ПЦР является то, что такое обследование позволяет изучить увеличенный ДНК участок множество раз (до нескольких десятков-сотен раз). Кроме того отличается процент точности в расшифровке, так как в биоматериале пациента специалист может изучать одиночную ДНК. Как правило, если другие методы диагностики подтверждают наличие хламидиоза, возбудителем которого является хламидия трахоматис, анализ ПЦР кровь или мазок нужно брать для подтверждения или опровержения этого.

ПЦР применим для поиска следующих болезней:

  • урогенитальные инфекции;
  • гепатит;
  • туберкулез;
  • папиллома вирус человека;
  • дифтерия;
  • сальмонеллез;
  • ВИЧ;
  • хеликобактериоз.

Несмотря на высокие показатели точности, у ПЦР анализа могут случаться погрешности, так как результаты обследования касаются только клеточного материала, который брался для процедуры. Определить точную скорость развития хламидиоза можно не всегда со 100% точностью.

ИФА на хламидии

Анализ ИФА или иммуноферментный анализ – это относительно новый метод диагностики, который предполагает рассмотрение избирательной реакции антигенов и антител, то есть специфических иммунологических реакций. Для этого проводится анализ крови, благодаря такому биоматериалу можно выявить возбудителя инфекции.фото 2

Назначения для ИФА:

  • ВИЧ;
  • сифилис;
  • уреаплазма, микоплазма и хламидии;
  • гепатит;
  • герпес;
  • цитомегаловирус.

Такой метод обследования используют также для определения баланса гормонов, наличие инфекционных возбудителей, а также онкологические новообразования. Минусом такого способа обследования можно считать то, что наличие антител может не только говорить о присутствии заболевания, но и про недавний контакт с возбудителем. Преимуществом является способность выявления заболеваний, что не отражаются иммунной системой -микоплазмоз, уреаплазмоз, трихомониаз (у мужчин, у женщин). Какие анализы нужно сдавать при трихомониазе, можно узнать в отдельной статье.

Расшифровка результатов и нормы

Проведение ПЦР на хламидии по моче, мокроте или крови пациента может предполагать также взятие соскобов уретры (реже из цервикального канала), которые как берут у женщин, так и мужчин. Проводить анализ можно по прошествии хотя бы суток после последнего полового акта.

Расшифровка анализов ПЦР имеет только два варианта:

  1. Положительный – ПЦР выявил хламидии, а значит, присутствие инфекции тоже и ее тип.
  2. Отрицательный – отсутствие антител в биоматериале говорит об отсутствии заражения. Но если анализ проводили меньше 24 часов после полового акта, организм мог просто не выработать еще антител.

Перед сдачей ПЦР на поиск хламидий, специалист должен оговорить тонкости, как сдавать женщинам и мужчинам такое анализ, чтобы получить очные результаты.фото 2

При исследовании, чаще всего ИФА анализ востребован за счет безопасности и легкости проведения. В крови пациента выявляют антитела IgM, IgA и IgG, которые покажут вид возбудителя и стадию развития инфекции. Если специалист установил отрицательный ответ на один вид хламидий, положительный к другому виду, можно говорить о таких стадиях инфекции:

загрузка...
  • IgM – острое течение;
  • IgA – прогрессирующее течение;
  • IgG – хроническая инфекция;
  • IgG+IgM – иммунитет справляется с инфекцией, а значит, пациент находится на стадии выздоровления.

Учитываются также соотношения количественные между найденными антителами:

  • показатели в пределах нормы говорят об отсутствии угрозы;
  • отрицательно на все Ig говорит об отсутствии инфекции, а значит, и иммунитета к таким возбудителям;
  • положительно на IgG говорит о заражении в прошлом и наличии вторично развитой инфекции сейчас.

После прохождения лечения пациенту обязательно нужно сдать ИФА анализ повторно, после чего в крови могу быть выявлены следующие результаты и расшифровка:

  • IgM_IgA “-” и IgG “+” – наличие иммунитета к хламидиозу;
  • IgG_IgA “-” и IgM “-” – острая фаза инфекции;
  • IgM_IgA_IgG “+” – инфекция перешла в хроническую форму.

По мнению большинства специалистов, для получения большей картины происходящего внутри организма лучше прибегнуть к обоим способам диагностики.фото 5

Почему разнятся результаты?

При определенных обстоятельствах полученные результаты анализа ПЦР и иммуноферментного анализа могут не совпадать. Этому способствуют следующие причины:

  1. ИФА обычно является таким себе “следом”, оставленным инфекцией. Если ПЦР не обнаружил ДНК хламидиоза, ИФА анализ может еще проявляться оставленный “след” перенесенной ранее инфекции.
  2. Есть, также, существенная разница в используемом оборудовании. Если ПЦР отрицательный, а ИФА положительный, это является следствием работы тест-систем, которые могу находить самые труднодиагностируемые бактерии и микробы. ПЦР, например, может выявить возбудителя хламидия трахоматис, в то время как ИФА все существующие виды.
  3. Есть разница в исследуемом биоматериале. ПЦР берут анализ из места, где предположительно концентрируется инфекция. Для ИФА не никакой разницы в месте расположения возбудителя. В этом случае иммуноферментный анализ показывает более точные данные.
  4. Еще одна причина – хроническая стадия хламидиоза, когда положительный ответ дает ПЦР, а ИФА отрицательный. Такое бывает из-за уставшей бороться иммунной системы, а также в случае свежего инфицирования, когда еще не вырабатываются антитела.

Оба варианта обследования нельзя заменить другими способами диагностики, а выносить точный диагноз можно только при комплексной оценке полученных результатов ПЦР и ИФА.

Что выбрать в моем случае?

Для многих пациентов основной причиной выбора из ПЦР и ИФА является стоимость таких процедур. Так, к примеру, цена на ПЦР хламидиоза составляет в среднем 150-250 рублей, в то время как цена на ИФА 400-500 рублей. Разница в цене есть, но не настолько существенная, чтобы выбирать по этому критерию способ обследования. Специалисты советуют проводить сразу два анализа, чтобы дать комплексную и точную оценку.фото 4

Разница между ИФА и ПЦР:

  • ИФА выявляет контакты с возбудителем, а ПЦР развитие инфекции в организме;
  • ПЦР не может оценить распространенность инфекции, как ИФА.

Ни одни медик не даст однозначный ответ, какие анализы лучше для выявления хламидиоза, и как сдавать женщинам анализ, чтобы дать 100% точный результат. Это возможно при проведении обоих процедур, так как они имеют свои преимущества и недостатки.

Кровь на лямблии: как сдавать анализ на антитела, норма и расшифровка

Появлению лямблиоза способствует паразит Lamblia Giardia. Этот микроорганизм может находиться в сырой воде, на почве, одежде и на поверхности различных предметов, сохраняя свою жизнеспособность долгое время.

Инвазивным источником гельминтоза является зараженный человек. В его кишечнике обитают лямблии.

Эта болезнь распространена среди людей, которые не придерживаются гигиенических правил. Ведь для глистной инвазии достаточно, чтобы в организм попал даже один гельминт.

Симптомами лямблиоза являются:

  1. продолжительная диарея;
  2. уменьшение массы тела;
  3. озноб, возрастание температуры до 38 градусов;
  4. высыпания на коже;
  5. боль в животе;
  6. постоянная тошнота, иногда сопровождающаяся рвотой.

Если у человека возникает сразу несколько вышеописанных проявлений, то ему нужно обратиться к паразитологу, инфекционисту либо гастроэнтерологу. Первое, что сделает врач – назначит анализ крови на гельминты. Но как сдавать анализы и что это такое?

Лямблии: как их обнаружить в организме человека?

Лямблии: как их обнаружить в организме человека?Лямблии: как их обнаружить в организме человека?Зачастую лямблии себя никак не проявляют, поэтому при хорошем иммунитете человек сам выздоравливает через несколько недель. Но во многих случаях признаки гельминтоза все же присутствуют.

Чтобы подтвердить диагноз врачу необходим положительный результат на лямблиоз. Для этого пациенту назначается исследование кала и крови. Такие анализы являются взаимодополняющими, с их помощью можно точно определить присутствие паразитов в человеческом организме.

У некоторых пациентов, особенно у детей, пищеварительная система плохо работает либо слабо развита. В таком случае после попадания в кишечник гельминты способствуют появлению выраженной клинической картины.

Глист разрушает слизистую тонкого кишечника, вследствие чего она воспаляется. При этом возникают спазмы, происходит нарушение пищеварения и перистальтики, а питательные вещества и витамины плохо всасываются.

На начальном этапе лямблиоз проявляет себя в виде острой кишечной инфекции. Поэтому у больного повышается температура, болит живот, появляется понос и рвота. В скрытой форме заболевание практически не протекает.

При хроническом лямблиозе у людей со слабым иммунитетом развиваются следующие симптомы:

  • повышенная раздражительность;
  • метеоризм;
  • быстрая утомляемость;
  • урчание в животе;
  • светлый налет на языке;
  • запор, сменяющийся диареей.

кожные сыпи и прочие аллергические проявления при лямблиозекожные сыпи и прочие аллергические проявления при лямблиозеКроме перечисленных проявлений, практически у 40% людей при хроническом лямблиозе возникают кожные сыпи и прочие аллергические проявления.

Все эти признаки сигнализируют о том, что необходимо сдать анализ крови на лямблии. Однако этот вид паразитов может быть обнаружен и при исследовании каловых масс, только если в них будут выявлены цисты глистов.

Но несмотря на распространенность и недорогую цену анализ каловых масс малоинформативный. Ведь в ряде случаев возбудитель не выявляется, даже если он действительно паразитирует в организме человека.

Сегодня самой точной диагностикой считается ИФА – иммуноферментный анализ. Однако он не эффективен в первый день глистной инвазии, его можно проводить лишь через 21 день после заражения.

Этот анализ показывает антитела к антигенам лямблий, присутствующие в венозной крови.

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для избавления от паразитов наши читатели успешно используют Intoxic. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Подготовка и сдача анализа

Чтобы анализ на лямблии был точным, и его нужно было сдавать всего один раз, в процессе подготовки к исследованию важно соблюдать определенные правила:

  1. перед обследованием нельзя есть;
  2. за 1-3 дня не рекомендовано употреблять алкоголь и курить;
  3. чтобы результат не оказался ложноотрицательным, перед анализами нежелательно принимать лекарственные средства;
  4. в день сдачи не стоит проявлять чрезмерную физическую активность;
  5. за сутки до обследования не следует есть острое и жирное.
  6. анализ крови на лямблии запрещено сдавать после физиотерапевтических процедур, ректального обследования либо рентгеноскопии.

Кровь на исследование на присутствие гельминтов в организме берут из вены на сгибе локтя.

Показаниями для забора крови на антитела к паразитам, можно считать тошноту, диарею, сменяющуюся запорами, вздутие и урчание в животе, дискомфорт в желудке или кишечнике и проблемы с пищеварением.

Но выявить лямблиоз в крови можно лишь по прошествии 1-3 недель после проникновения паразитов в тело хозяина. При этом глисты могут никак не проявлять себя, но при первом возникновении хотя бы двух из вышеописанных признаков, необходимо сразу же обратиться к инфекционисту или паразитологу, чтобы сдать все необходимые анализы.

Расшифровка исследования крови

сдача анализа сдача анализа В процессе расшифровки результатов анализов на наличие лямблий врач учитывает отсутствие либо наличие специфических антител IgG и IgM. Они отвечают за уничтожение паразита, и их процентное соотношение к патогенным микробам.

Если лямблиоз протекает в острой форме, тогда преобладают антитела IgG. Кроме того, их численность совместно с IgM сильно возрастает в случае хронического течения гельминтоза.

Анализ крови на гельминты, а точнее, на антитела к лямблиям может быть положительный, сомнительный либо отрицательный. Примечательно, что иммуноглобулин к глистам могут обнаруживаться в крови и при прочих паразитозах и инфекционных болезнях. Поэтому диагностировать лямблиоз можно лишь после проведения комплексной диагностики.

Сегодня для выявления лямблиоза и прочих иммунных и инфекционных заболеваний, используются диагностические способы, с помощью которых исследуются молекулярные структуры микроорганизмов. К таким диагностическим методам относится ИФА и ПЦР.

ПЦР-диагностика

ПЦР-анализ дает возможность выявить клетки глистов в тонкой кишке (верхний отдел). Полимеразная цепная реакция заключается в изучении фрагментов ДНК паразитов, основываясь на последовательность генома лямблий.

Исходными материалами для ПЦР-теста являются каловые массы и кровь, изредка нужно сдавать желчь. Результаты исследования помогают определить стадию гельминтоза и интенсивность его прогрессирования. Также ПЦР используют для контроля эффективности противопаразитарной терапии.

Анализ ДНК лямблий является быстрым и высокоэффективным диагностическим методом, у которого имеется масса преимуществ:

  • сравнительно быстрое проведение;
  • с большей вероятностью определяет наличие глистов;
  • современная аппаратура быстро определяет участок ДНК лямблий.

Если ответ ПЦР-теста оказался положительным, то в результатах пишется, что в материале была выявлена ДНК Giardia lamblia.

При сомнительных данных указывается степень иммунного ответа (количество антител). Норма, характеризуется отсутствуем ДНК паразитов в изученном материале.

Иммуноферментный анализ

Иммуноферментный анализИммуноферментный анализИФА необходимо сдать, чтобы врач имел возможность изучить иммунную и ферментную реакцию крови. С помощью специфических реакций определяются антитела и антигены.

Для полноценного обследования кровь берут три раза. Это необходимо для определения наличия Lamblia, anti-Giardia Lamblia iga.

При проведении анализа применяются тест-системы, благодаря которым можно обнаружить особые глобулины (IgG, A, M). Процент инвазии лямблиями определяет коэффициент позитивности (тест-система «Лямблия – AT»).

Если в анализе есть только IgM, то это указывает на острую форму лямблиоза. В исследовании с применением серологических маркеров-антител IgG и IgM при гельминтозе доктор указывает маркеры IgG – +, IgM – +, вегетативные формы и цисты – +.

Расшифровка ответа по ИФА подтверждает диагноз «лямблиоз», когда IgM (кп.1-2) +, а IgG не выявлен. Так, определяется заражение лямблиями, продолжительностью от 1 до 3 месяцев.

Если IgM (К. П. – 2) и присутствие цист в результатах анализа пишут, что у пациента «острый лямблиоз». В случае, когда IgG равняется (К. П. 1-2), а IgM не выявлен, однако были обнаружены цисты, диагностируется хроническая форма лямблиоза с незначительной численностью размножающихся паразитов.

Если результаты анализов показали абсолютное отсутствие вегетативных форм и IgM, IgG, то это свидетельствует о протекании вторичного процесса на фоне иммунодефицита.

Благодаря гемотесту можно провести комплексную диагностику глистной инвазии с использованием способа ИФА. В процессе исследования применяется 9 реагентов:

  1. хромогена;
  2. иммуносорбента контрольного образца;
  3. буферного состава;
  4. крови без антител к паразитам.

При расшифровке анализа сопоставляется отрицательный контроль с конечным результатом. Положительный ответ принимается лишь в случае, когда его значение гораздо больше 1,0, умноженного на величину плотности (оптическая).

Показатели конечного результата могут варьироваться до 0.85*ОПд. В таком случае сданный анализ являйся нерезультативным и его необходимо провести повторно через 3 недели.

Цена исследования невысокая, но при этом используется современное оснащение. Однако у него есть свои недостатки, так как можно определить только факт присутствия антител, а их титр и специфическая величина не устанавливаются.

Если коэффициент антител равен 202 у.е., а титр – 1:3200, такие параметры оцениваются, как положительные. Если титр составляет 1:100 при пяти условных единицах, то это результат расценивается как отрицательный. Если коэффициент антител колеблется 101-135 единиц, то это значит, что пациент является носителем гельминтов при их абсолютном отсутствии. Какие еще бывают анализы на лямблии, расскажет специалист в видео в этой статье.

  • Анализ на лямблии: как сдавать взрослому тест на лямблиозАнализ на лямблии: как сдавать взрослому тест на лямблиоз Анализ на лямблии: как сдавать взрослому тест на лямблиоз
  • Анализ крови на эхинококк: норма антител и расшифровкаАнализ крови на эхинококк: норма антител и расшифровка Анализ крови на эхинококк: норма антител и расшифровка
  • Анализ на острицы: как сдавать кровь и кал на энтеробиозАнализ на острицы: как сдавать кровь и кал на энтеробиоз Анализ на острицы: как сдавать кровь и кал на энтеробиоз

Лабораторные методы диагностики сифилиса

  • Антитела к бледной трепонеме и серологическая диагностика
  • Лабораторная диагностика сифилиса с применением серологических реакций
  • Диагностика сифилиса с применением нетрепонемных тестов
  • Реакция связывания комплемента (РСК кард, КСК с КА, реакция Вассермана)
  • Диагностика сифилиса с применением трепонемных тестов
  • Микробиологическая диагностика
  • ПЦР на сифилис

Анализ на сифилис является одним из самых распространенных среди лабораторных исследований. Широко используются анализы на сифилис при проведении профилактических обследований. При помощи микроскопии выявляется возбудитель сифилиса — бледная трепонема. При помощи серологических реакций подтверждается диагноз сифилиса, устанавливается диагноз скрытого сифилиса, проводится контроль эффективности лечения, определяется излеченность больных.

Диагноз сифилиса устанавливается на основании клинических данных, обнаружении возбудителей сифилиса в образцах материала и подтверждении диагноза серологическими методами исследования. Проявления сифилиса многочисленны и многообразны, ввиду чего болезнь выявляется врачами разных специальностей. Дифференциальная диагностика первичного сифилиса проводится с целым рядом заболеваний.

Антитела к бледной трепонеме и серологическая диагностика

При заражении сифилисом в организме больного образуются антитела. Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

Антитела к бледной трепонеме IgM

Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения. На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода. Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после лечения раннего сифилиса, через 3 — 6 мес. — после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит признаком рецидива сифилиса или говорит о повторном заражении. Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

Антитела к бледной трепонеме IgG

Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

Неспецифические антитела

Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем. В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др. Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

Ложноположительные анализы на сифилис

Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций. Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе,  онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя. Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.

к содержанию ↑

Лабораторная диагностика сифилиса с применением серологических реакций

Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.

1. Нетрепонемные тесты

В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные. Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена. В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др. С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения. Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.

2. Трепонемные тесты

В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов. В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.

3. Тесты на сифилис с использованием рекомбинантных антигенов

Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.   

к содержанию ↑

Диагностика сифилиса с применением нетрепонемных тестов

Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления твердого шанкра. Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, вторичным и рецидивным сифилисом. Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с третичным активным сифилисом, в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.

Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.

к содержанию ↑

Реакция связывания комплемента (РСК кард, КСК с КА, реакция Вассермана)

Реакция Вассермана (RW, РВ), изобретенная А. Вассерманом более 100 лет назад, сегодня претерпела множество изменений, однако, как дань традиции, сохранила свое название по настоящее время. Реакция связывания комплемента с применением кардиолипинового антигена предназначена не только для выявления антител, но и выполняется в количественном варианте — с разными разведениями сыворотки, что позволяет использовать ее для контроля эффективности лечения. Низкая чувствительность и специфичность, получение ложноположительных результатов — отрицательные стороны данного вида исследования.

Суть реакции Вассермана заключается в следующем: антигены, которые применяются при постановке реакции Вассермана, в случае наличия антител к возбудителям сифилиса в крови человека посредством комплимента связываются с ними и выпадают в осадок. Интенсивность реакции обозначают знаком (+). Реакция может быть отрицательной (-) — отсутствие осадка, сомнительной (небольшой осадок или +), слабоположительной (++), положительной (+++) и резко положительной (++++).

Более чувствительной является видоизмененная реакция Вассермана — реакция Колмера. С ее помощью выявляются антитела в сыворотках, где реакция Вассермана дала отрицательный результат.

При резко положительных реакциях проводится количественное определение реагинов, для чего используется сыворотка в разведениях от 1:10 до 1: 320, что позволяет использовать данный вид исследования для контроля эффективности лечения. Например, снижение титра антител и последующая их серонегативация (получение отрицательных результатов), говорит об успешном излечении заболевания.

Микрореакция преципитации (МРП)

Микрореакция преципитации применяется для массовых обследований отдельных групп населения, диагностики сифилиса и контроля над эффективностью лечения. Для проведения данного вида исследования необходимо небольшого количества исследуемого материала. В основе микрореакции преципитации лежит иммунологическая реакция антиген-антитело. В случае наличия антител в сыворотке крови обследуемого комплекс антиген-антитело выпадает в осадок с образованием хлопьев. Реакция проводится в лунках специальной стеклянной пластины. Оценивается по интенсивности выпавшего осадка и величине хлопьев в (+) как реакция Вассермана. При обследовании беременных, доноров и для контроля эффективности лечения не применяется. VDRL и RPR являются разновидностями микрореакций.

Все положительные тесты, полученные при проведении неспецифических серологических реакций, требуют подтверждения специфическими реакциями — трепонемными тестами.

к содержанию ↑

Диагностика сифилиса с применением трепонемных тестов

При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения. Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии. Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.

РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями. При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ, РИТ)

Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%. РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных. РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Суть реакции заключается в том, что бледные трепонемы (антигены), соединенные с антителами, меченными флюорохромами, издают в люминесцентном микроскопе желто-зеленое свечение. Результат оценивается знаком (+). С помощью РИФ выявляются иммуноглобулины класса А.  Реакция иммунофлюоресценции становится положительной раньше, чем реакция Вассермана. Она всегда положительная при вторичном и латентном сифилисе, в 95 — 100% случаев положительная при третичном и врожденном сифилисе. Техника проведения данного вида исследования проще, чем у РИБТ, но заменить РИФ на РИБТ невозможно, так данная реакция уступает РИБТ по специфичности. РИФ-10 (модификация РИФ) более чувствительна, РИФ-200 и РИФ-абс более специфичны.

Реакция иммунного прилипания бледных трепонем (РИПБТ)

Суть реакции заключается в том, что сенсибилизированные сывороткой больного бледные трепонемы в присутствии комплемента прилипают к поверхности эритроцитов. Полученные комплексы при цетрофугировании выпадают в осадок. Чувствительность данного теста и специфичность близки к РИФ и РИБТ.

Иммуноферментный анализ на сифилис (ИФА)

С помощью ИФА определяются иммуноглобулины класса М и G. Методика IgM – ИФА может быть использована в качестве скринингового и подтверждающего теста. Чувствительность ИФА и его специфичность аналогичны РИФ. При сифилисе ИФА дает положительные результаты с третьего месяца инфицирования и довольно долго (иногда всю жизнь) остается положительным.

Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (РПГА)

РПГА основана на способности эритроцитов, на которых адсорбированы антигены бледной трепонемы, в присутствии сыворотки больного склеиваться (гемагглютинация). РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса, в том числе скрытого. При применении высокого качества антигена данный вид серологической реакции превышает все остальные тесты по специфичности и чувствительности.

к содержанию ↑

Микробиологическая диагностика

Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).

Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.

Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.

Обнаружение бледных трепонем при микроскопии в темном поле — абсолютный критерий окончательной диагностики сифилиса.

к содержанию ↑

ПЦР на сифилис

Эффективным и перспективным сегодня является методика проведения полимеразной цепной реакции. ПЦР на сифилис позволяет получить результат в течение нескольких часов, а в собранном для диагностики материале может присутствовать хотя бы несколько возбудителей заболевания.

Чувствительность данного метода исследования зависит от наличия в биологическом материале бледных трепонем и достигает 98,6%. Специфичность данного теста во многом зависит от правильного выбора мишени для амплификации при проведении диагностики и достигает 100%.

Вместе с тем, в связи с недостаточно изученной сравнительной характеристики чувствительности и специфичности прямых методов диагностики сифилиса и ПЦР, данный метод обследования в РФ для диагностики заболевания пока не разрешен.

ПЦР на сифилис разрешено проводить лишь в некоторых случаях, как дополнительный метод диагностики врожденного сифилиса, нейросифилиса, при затруднениях проведения диагностики сифилиса с использованием серологических методов исследования у ВИЧ-больных.


Watch this video on YouTube